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牛奶乳清蛋白的双向电泳分析

为了探索牛奶乳清蛋白提取的最优方法,以生鲜荷斯坦牛奶为实验对象,采用不同等电点(pH4.6pH4.8)沉淀法和超速离心法提取牛奶中乳清蛋白样品,并且对提取效果进行双向凝胶电泳(two-dimensional electrophoresis2-DE)图谱分析。

依据凝胶图谱上蛋白斑点比较图谱质量,采用PDQuest 8.0凝胶图像分析软件进行凝胶图谱分析。分析结果显示:2种方法均能有效提取牛奶乳清蛋白,获得的2-DE凝胶图谱背景清晰、蛋白点个体独立、无明显的拖尾现象,且重复性强,但都存在一定的酪蛋白残留。

与超速离心法相比,pH4.6沉淀法和pH4.8沉淀法所提取乳清蛋白的2-DE凝胶图谱可检测到比较多的蛋白质斑点。pH4.6沉淀法提取乳清蛋白制备的2-DE凝胶图谱中蛋白点的表达丰度略高于pH4.8沉淀法。研究表明:pH4.6沉淀法提取乳清蛋白制备2-DE凝胶图谱略优于pH 4.8沉淀法和超速离心法。但2 种等电点沉淀法和超速离心法都可有效去除牛奶中的高丰度酪蛋白,提高低丰度蛋白的检出敏感性。